Trois problèmes à l’heure actuelle : la multirésistance bactérienne, les infections nosocomiales (IN) et la pénurie d’antibiotiques. Nous avons un besoin urgent de nouvelles molécules antibactériennes, avec un mécanisme d’action innovant. La première interface bactéries/molécules, est la paroi bactérienne ; cible idéale dans la mesure où certains éléments ou motifs sont très conservés d’un genre à un autre ou d’une espèce à une autre. Mais peu nombreuses sont les techniques qui nous permettent, actuellement, d’évaluer l’impact des antibactériens sur la structure, la composition ou les fonctions de cette paroi. Le paraguanidinoéthylcalix[4]arène (ou Cx1) est un nouvel antibactérien cationique, à large spectre, non toxique, actif sur les bactéries multirésistantes (BMR), avec une cible d’action pariétale potentielle, dont nous ne connaissons pas le type d’activité (bactéricide ou bactériostatique). Nous avons donc développé, parallèlement à la réalisation des courbes de bactéricidie, une technique de marquage des bactéries par deux fluorochromes, SYTO9^® et iodure de propidium (IP), pour suivre les modifications de perméabilité membranaire, induites par le Cx1. Les résultats obtenus démontrent que, pour Escherichia coli ATCC 25922, le Cx1 possède : une activité bactéricide, de type concentration-dépendante ; entraîne une altération graduelle, temps et concentration dépendante de la perméabilité membranaire, avec présence de formes filamenteuses. En conclusion : le double marquage SYTO9^®-IP, permet une détection simple et rapide, facile à mettre en œuvre, de l’impact de nouveaux antibactériens, sur la paroi bactérienne ; le Cx1 interagit donc bien avec la paroi bactérienne, entraînant au final une perte d’intégrité membranaire.

Three problems at the moment: multidrug-resistant bacteria, healthcare-associated infections, and decrease of active antibiotics. We have an urgent need of new antibacterials, with an innovative mechanism of action, in order to avoid too quickly bacterial resistance. The first interface between bacteria and antibiotics is the bacterial cell wall. It is a very interesting target, as far as some components or motives are highly conserved between genus or species, and wall destabilization conduct rapidly to bacterial lysis. However, few methods are at our disposal to study rapidly impact of such antibacterials on the structure, composition or functions of the bacterial cell wall. The paraguanidinoethylcalix[4]arene (Cx1) is a new cationic antibacterial drug, with a broad spectrum, not toxic, active on multidrug-resistant bacteria, with a possible parietal target, but with unknown kind of activity (i.e. bactericidal or bacteriostatic). We thus developed, at the same time as the realization of the time-kill curves, a technique to stain bacteria with two dyes: SYTO9^® and propidium iodide (PI), to follow the membrane permeability modifications, due to Cx1 exposure. The obtained results demonstrate, for Escherichia coli ATCC 25922, that Cx1 possesses a bactericidal activity, concentration-dependent, with a gradual achievement of membrane permeability, time- and concentration-dependent, with the presence of filamentous bacteria. In conclusion: the SYTO9^®-PI double staining, allows a simple and fast detection, easy to implement, of the impact of new antibacterial on the bacterial wall; and Cx1 interacts well with the bacterial wall, pulling in the end a loss of membrane integrity.